一、 信號形態學：識別“真偽”與“良莠”

二、 核心判讀邏輯：從“數數”到“比值”

1. 信號計數：在油鏡下，隨機選擇至少20個形態完整的腫瘤細胞核。對每個核分別計數紅色信號（HER2基因探針）和綠色信號（CEP17著絲粒對照探針）。當信號緊密重疊難以分辨時，需輕微調節微調旋鈕，利用Z軸斷層掃描確認信號數量。
2. 比值計算：計算所有細胞HER2信號總數與CEP17信號總數的比值。根據國際指南（如CAP標準）：
   • 陽性（擴增）：比值 ≥ 2.0，或雖比值<2.0但平均HER2拷貝數≥6.0（提示多體性）。
   • 陰性（無擴增）：比值 < 2.0且平均HER2拷貝數 < 4.0。
   • 臨界值：比值 < 2.0且拷貝數在4.0-6.0之間，需增加計數細胞數或重復實驗。
      

三、 特殊模式識別：解碼“分離”與“融合”

• 分離信號（Break-Apart）：用于檢測基因重排（如ALK、ROS1）。探針設計在基因兩端（紅、綠）。正常細胞顯示黃色融合信號（紅綠疊加）。當發生斷裂易位時，紅綠信號物理分離（間距大于兩個信號直徑），提示染色體結構畸變。通常以>15%的細胞出現分離判為陽性。
• 缺失信號（Deletion）：用于檢測抑癌基因丟失（如1p/19q）。在二倍體細胞中，著絲粒探針（綠）和位點探針（紅）應成對出現（1綠1紅）。當位點探針信號缺失（只見綠，不見紅），即提示該區域存在雜合性缺失（LOH），這是少突膠質細胞瘤的診斷特征。
   

四、 質控紅線：內對照的“定海神針”